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凯式定氮仪方法如何估计食物中的蛋白质

发布时间:2025/4/2720

    食物的蛋白质含量可通过多种方法确定,用于蛋白质分析的凯氏定氮法和氮燃烧法基于氮测定,这两种方法都是用于食品营养标签的目的,虽然凯氏定氮法已被广泛使用了一百多年,但最近在许多情况下使用氮燃烧法方法的自动化仪器正在取代凯氏定氮法的使用。
    凯式定氮仪程序测量样品的氮含量,然后可以假设所分析的特定食物的蛋白质与氮的比率,来计算蛋白质含量,凯氏法程序基本上可分为三个部分消化,蒸馏,滴定。在消化步骤中,有机氮在催化剂存在下在约370摄氏度转化为铵。在蒸馏步骤中,用NaOH将消化的样品碱化,并以NH3蒸馏出氮气。该NH3被捕获在硼酸溶液中。通过用标准HCl溶液滴定,来量化该溶液中氨氮的量,通过分析进行试剂空白,并从每次测定中减去该空白所需的HCl滴定剂的体积。
    一、消化
    打开消化块并加热到适当的温度,准确称重约0.1克玉米粉,记录重量,将玉米粉放入消化管中,重复两个样本。用玉米粉向每个管中加入一种催化剂片剂和适当体积的浓硫酸。样品中使用的一个催化剂片剂+体积的硫酸+称重纸。将消化管架放在消化块上,盖上消化块,打开排气系统,让样品消化直至消化完成,样品应清晰,没有烧焦的材料。从消化块中取出样品,并在排气系统仍然打开的情况下冷却。用适量的dd水小心稀释消化液。旋转每个管。
    二、蒸馏
    按照适当的程序启动蒸馏系统,将适量的硼酸溶液分配到接收瓶中,将接收瓶放在蒸馏系统上,确保来自样品蒸馏的管子浸没在硼酸溶液中,将样品管放置到位,确保其牢固就位,然后进行蒸馏直至完成,在该蒸馏过程中,将一定体积的NaOH溶液输送到管中,蒸汽发生器将样品蒸馏一段时间,完成一个样品的蒸馏后,继续使用新的样品管并接收烧瓶,完成所有样品的蒸馏后,按照制造商的说明关闭蒸馏装置。
    三、滴定
    如果使用自动pH计滴定系统,按照制造商的说明校准仪器,将磁力搅拌棒放入接收瓶中,并将其放在搅拌盘上,滴定时保持溶液快速搅拌,但不要让搅拌棒碰到电极,滴定每个样品并空白至终点pH为4,记录使用的HCl滴定剂的体积,如果使用比色终点,将磁力搅拌棒放入接收瓶中,将其置于搅拌板上,并在滴定时保持溶液剧烈搅拌,滴定每个样品并用标准化的HCl溶液空白至个微弱的灰色。记录使用的HCl滴定剂的体积。

文章来源:上海靳澜仪器制造有限公司
 

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